超聲波細(xì)胞破碎儀又名超聲微波協(xié)同萃取儀，超聲波細(xì)胞裂解儀，超聲波納米材料粉碎機(jī)。超聲波細(xì)胞破碎儀由超聲波發(fā)生器和換能器兩大部分組成（有的配置有隔音箱）。具有破碎組織、**、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)，勻質(zhì)、乳化、混合、脫氣、崩解和分散、浸出和提取，加速反應(yīng)等功能，故廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、化學(xué)、制藥、食品、化妝品、環(huán)保等實(shí)驗(yàn)室研究及企業(yè)生產(chǎn)。

　　日常維護(hù)

　　1、溫度保護(hù)設(shè)置點(diǎn)必須比室溫或樣品溫度高5℃以上。當(dāng)發(fā)生溫度保護(hù)時可按SET健4秒以上，重新設(shè)置保護(hù)值。設(shè)錯溫度時也可按SET鍵4秒以上復(fù)位。

　　2、嚴(yán)禁在變幅桿未插入液體內(nèi)(空載)時開機(jī)，否則會損壞換能器或超聲波發(fā)生器。

　　3、對各種細(xì)胞破碎量的多少，時間長短，功率大小，有待用戶根據(jù)各種不同細(xì)胞再摸索確定。此儀器輸出功率較大，如選用Ф2、Ф3或Ф6變幅桿時，應(yīng)把功率開得小些，以免變幅桿過載而斷裂。

　　4、用**時間后變幅桿末端會被空化腐蝕而毛，可用油石或銼刀銼平，否則會影響工作效果。

　　5、變幅桿選擇開關(guān)是用來匹配不同規(guī)格的變幅桿與發(fā)生器的頻率，阻抗的一致性。如換能器組件的頻率與發(fā)生器的阻抗不一致時，超聲波就不能工作。

　　6、不需預(yù)熱，使用應(yīng)有良好的接地。

　　7、在超聲破碎時，由于超聲波在液體中起空化效應(yīng)，使液體溫度會很快升高，用戶對各種細(xì)胞的溫度要多加注意。建議采用短時間(每次不超過5秒)的多次破碎，同時可外加冰浴冷卻。

　　8、超聲波細(xì)胞破碎儀采用無工頻變壓器的開關(guān)電源，在打開發(fā)生器機(jī)殼后切勿亂摸，以防觸電。本儀器性能可靠，一般不易損壞。　　9、超聲波細(xì)胞破碎儀應(yīng)安放在干燥，無潮濕、無陽光直射、無腐蝕性氣體的地方工作。

　　10、短時間的多次工作，工作時間1-2秒，間隙時間1-2秒，比連續(xù)長時間工作的效果要好。為防止液體發(fā)熱，可設(shè)定較長的間隙時間。

　　日常保養(yǎng)：用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲！

　　維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程

　　1如果探頭必須與固體樣品接觸，請使用切成70毫米長的20毫米直徑不銹鋼管。不要用玻璃管

　　2微端頭只能與液接觸，不得與其它物體接觸

　　3在每次使用前，把探頭端頭放在水或者酒精中并且通電源數(shù)秒以去除殘余物

　　4探頭可以用高壓蒸鍋**，也可以浸入開水中**，也可以用****劑**

　　5不得把錐形微端頭用在連接器上。沒有連接器不要用直端頭。在處理低表面張力液體時不得使用帶螺紋端和可更換的端頭的探頭

**工程菌胞內(nèi)表達(dá)主要分為兩種形式，一種是在強(qiáng)啟動子條件下的**表達(dá)，由于蛋白的過度表達(dá);

使蛋白不能及時有效折疊而發(fā)生無規(guī)則卷曲，以固體顆粒的形式堆積于胞間質(zhì)中，這就是所說的包涵體;

另外一種是間質(zhì)內(nèi)的可溶性表達(dá)，即可以發(fā)生正常折疊，具有生物活性。

一般情況下，**只要被正常破壁就可以通過離心的形式將包涵體和可溶性表達(dá)的蛋白分離開。

超聲破碎的條件一般是300w，10s/10s，20分鐘，具體條件可根據(jù)自身情況而定。

超聲前菌體的準(zhǔn)備：菌液離心后，先用PBS將菌沉淀洗2-3遍;

然后按原菌液體積的1/5-1/10加入裂解液重懸菌體，裂解液的成分：

50mMTris-HCl,pH8.0,2mMEDTA，100mMNaCl，加溶菌酶至100ug/ml，0.1%TritonX-100。切記冰浴超聲！

如何判斷是否超聲**，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，一般有以下幾個方面：

1，外觀判斷：超聲前菌懸液是渾濁的，超聲**后變的透明、清澈。

2，液體的粘性：超聲后菌液從槍頭滴下不粘連。

3，高速離心：有用高速離心檢測超聲破碎程度的（一般用6,000g10min,比一般離心收集菌體的轉(zhuǎn)速高一點(diǎn)）。沉淀是未破碎或破碎不**的菌體。

4，染色：破碎后的菌液涂片，革蘭氏結(jié)晶紫溶液染色0.5分鐘，鏡檢。

（超聲后加入核酸酶**核酸對蛋白的污染）

一些需要注意的問題：

1，蛋白以包涵體形式表達(dá)，追求的是高破碎率，要求細(xì)胞碎片很小;

而另一種蛋白是可溶形式表達(dá)，所以細(xì)胞碎片不能很小，兩種情況要求不同但目的相同，都是便于后期的固液分離。

2，如果超聲時出現(xiàn)黑色沉淀，說明超聲功率太強(qiáng)。

3，超聲時間太長、功率太高對蛋白活性肯定有影響。

4，盡量防止泡沫的產(chǎn)生。